ELISA試劑盒產(chǎn)品具有良好的吸附性能,白紙也相對較低,孔底有較高的透明度,適用于血清血漿組織勻漿細胞培養(yǎng)基尿液等樣品類型,其中血清是常見的標本之一.下面一起來了解一下ELISA試劑盒血清標本保存注意事項:
一在采集樣品和分離血清時,應盡可能避免細菌污染.在一種情況下,細菌分泌的一些酶可能分解抗原和抗體等蛋白質(zhì);第二,一些內(nèi)生酶,如大腸桿菌中的?-半乳糖苷酶,會干擾以相應酶標記的測定方法.
二如果用無菌手術(shù)分離血清樣本,可在2℃保存一周,如果酶聯(lián)免疫吸附試驗滅菌,建議冷凍保存,樣品應長期保存在-70℃以下.
三冰凍血清樣本應注意避免因斷電等引起的反復凍融,反復凍融產(chǎn)生的機械剪切力會破壞樣品中的蛋白質(zhì)和其他分子,造成假陰性結(jié)果.此外,凍融標本混合也要小心,不要劇烈振蕩,反復反混合.
四應注意避免嚴重的溶血.血紅蛋白含有類似過氧化物的血紅素基團,因此,在測定HRP作為標記酶時,如果血清樣品中血紅蛋白濃度較高,則在孵育過程中容易吸附到固相,因此與HRP底物發(fā)生反應.
五用細菌污染引起的混濁或絮體保存樣品時,應離心沉淀,然后取涂片進行檢測.
Elisa中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上.平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘.