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elisa試劑盒檢測抗體常用的方法有哪些?

更新時間:2021-09-25點擊次數:1008
  ELISA(enzymelinkedimmunosorbentassay)酶聯免疫吸附劑測定,指將可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上,進行免疫反應的定性和定量方法。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標記的抗原或抗體,③酶作用的底物。
  下面來講解elisa試劑盒檢測抗體常用的間接法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
  ⑴將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
  ⑵加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
  ⑶加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
  ⑷加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
  本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。

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